Bioss 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
①檢測(cè)效果好：特異性強(qiáng)、靈敏度高，對(duì)細(xì)胞凋亡的結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)，陰陽(yáng)性分群效果明顯。
②操作簡(jiǎn)便快捷：只需分別加入緩沖液、熒光標(biāo)記物Annexin V和核染色液PI即可；且染色僅需15-20分鐘。
③檢測(cè)方法多樣：可以使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。
④質(zhì)量保證：原材料自主研發(fā)，嚴(yán)格質(zhì)量控制，無(wú)憂售后。
試劑盒簡(jiǎn)介
Annexin V細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V Apoptosis Detection Kit)是用熒光素FITC/AF647標(biāo)記的重組人Annexin V來(lái)檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷脂酰絲氨酸的一種細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒。還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液，碘化丙啶可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，呈現(xiàn)紅色熒光。對(duì)于壞死細(xì)胞，由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失，Annexin V-FITC/Annexin V-AF647可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi)，與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸結(jié)合，從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色/紅色熒光。
BA00101試劑盒檢測(cè)結(jié)果
Annexin V-FITC試劑盒的流式檢測(cè)效果參考圖1，熒光顯微鏡檢測(cè)效果參考圖2
圖1
圖1.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測(cè)效果驗(yàn)證圖。Jurkat細(xì)胞用10μM喜樹(shù)堿(Camptothecin)作用4小時(shí)后，未經(jīng)染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進(jìn)行染色(B)、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進(jìn)行染色(C)、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進(jìn)行雙染(D)。從圖中可以看出，未經(jīng)染色的是雙陰性細(xì)胞(A)，僅PI染色后出現(xiàn)了預(yù)期的PI染色陽(yáng)性的細(xì)胞，僅Annexin V-FITC染色出現(xiàn)了預(yù)期的Annexin V-FITC染色陽(yáng)性的細(xì)胞，Annexin V-FITC和PI雙染出現(xiàn)了預(yù)期的僅Annexin V-FITC染色陽(yáng)性的凋亡細(xì)胞和雙陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類(lèi)型、細(xì)胞凋亡情況、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
圖2
圖2. Annexin V-FITC和碘化丙啶(PI)染色效果圖。圖中綠色熒光為Annexin V-FITC染色細(xì)胞(圖a)，紅色熒光為碘化丙啶染色細(xì)胞(圖b)。僅被綠色熒光染色的為凋亡細(xì)胞，被綠色和紅色熒光雙染的是壞死細(xì)胞(圖c)，未被熒光染色的為正常細(xì)胞。
Annexin V檢測(cè)原理
Annexin V是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過(guò)程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine，簡(jiǎn)稱(chēng)PS)高親和力特異性結(jié)合。在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡(jiǎn)單而直接地檢測(cè)到磷脂酰絲氨酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。此方法被公認(rèn)為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。
