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快速簡(jiǎn)便操作：無(wú)需昂貴設(shè)備及相關(guān)操作經(jīng)驗(yàn)；
穩(wěn)定性：實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好，變異系數(shù)低；
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實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)易于處理分析。
試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線示例
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以上列表中ELISA試劑盒均采用雙抗體夾心法，此方法是檢測(cè)抗原最常用的方法。
雙抗體夾心法ELISA實(shí)驗(yàn)方案
雙抗夾心法是指將特異性結(jié)合抗原的抗體包被于微孔板上，制備成固相抗體，向微孔板中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本，再與HRP標(biāo)記另一株特異性針對(duì)抗原的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，加入TMB底物顯色后，形成有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與樣本中抗原的量呈正相關(guān)，再由酸終止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），通過(guò)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中抗原含量。
注：雙抗體夾心法必須采用經(jīng)測(cè)試過(guò)的配對(duì)抗體進(jìn)行。
ELISA實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
?在臨床檢驗(yàn)中，此法適用于檢測(cè)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、HCG等。
?只要獲得針對(duì)受檢抗原的特異性抗體，就可以用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。
?如抗體的來(lái)源為血清，包被和酶標(biāo)用的抗體最好分別取自不同種屬的動(dòng)物。
?如應(yīng)用單克隆抗體，一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。
?這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng)，作一步檢測(cè)。
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